只要明白原理,我深信以胡嘉然的动手水平完全可以做到。
“原理估计都够我一阵子琢磨的。”胡嘉然没有那么乐观,他完全没有这块知识,从头学起太费事了。
“这样吧,我给你说怎么做,你动手就可以了。”高风想了一下说道,他让胡嘉然来主要就是看中了后者的动手能力。
得益于患者家属强大的协调能力,一切都进展的很顺利。
首先是分离t细胞,在外周血中,使用离心等方法分离出t细胞,并进行进一步的清洗以去除红细胞和其他杂质。
这一步底层科研民工都能做到,对团队自然毫无压力。
基因改造这一步要先选择合适的逆转录病毒或其他病毒载体,高风选的是y-逆转录病毒,别问为什么,问了就是突发奇想。
“那用什么方法将编码car蛋白序列的外源基因转入t细胞中呢?”巩博士问道,这一步明显是最大的难点,他和几人琢磨了很久,现在还没有头绪。
“是不是可以用电离传导方法呢?”赵康出声道,“之前我参与过一个项目,他们就是采用的这个方法,就是成功率不怎么高。”
事实上成功率不是不高,而是特别低,那个项目最终流产了,出资方赔的哇哇叫。
“用电穿孔法吧。”胡嘉然说道,“我们把电压设置到”
“成功了!”巩博士大喊一声道,他有一点激动,剩下的全是不知所措。
说好的难
点呢?就这?
“让我看一下!”胡嘉然立马把他挤到了一边。
“快!赶紧验证一下现在的t细胞能不能表达car!”
验证的结果让人非常满意,这意味着研发流程往前进了一大步。
接着就是激活和扩增步骤,在添加适当的共刺激分子如cd3/cd28后,使用免疫磁珠系统刺激t细胞,并通过表达共刺激配体的细胞来诱导t细胞的大量增殖。
“可我们不会这个免疫磁珠系统啊。”胡嘉然跑着去找高风。
免疫磁珠的原理是运用核-壳的合成方法合成含有超顺磁性物质的高分子表面覆盖的复合材料、稳定性好、能进行后期标记的物质。
利用