一、降世
公元1822年12月27日，巴斯德诞生在法国东部裘拉（jura）省的洛尔镇（dole），镇中有一条清澈的溪流，巴斯德的家就在溪边的小路旁。父亲是拿破仑军骑兵队的一名退伍军人，退伍后当鞣革工人，母亲是农家女，他有一个姊姊和两个妹妹。四岁那年，全家迁往阿尔布瓦（arbois）。法国的中学通常是7年制，最后一学年分为哲学科和数学科。巴斯德在阿尔布瓦中学读6年，第7年转入布山松中学理科。中学时，他在学校表现普通，但很爱问问题，凡事追根究底，甚至因此成为某些老师的眼中钉。就这样不断地发问、学习，对化学、物理和艺术都有深厚兴趣的巴斯德渐渐变成优秀的学生。
二、大学
1840年8月，路易斯·巴斯德中学毕业，同年10月，他被聘为布山松中学的助教。在这段时间里，他一边任教，一边准备大学入学考试。当时，法国有两所着名学府——巴黎高等师范学院（ele norale superieure，ens）和高等理工科学校（éle polytechnie）。这两所学校在科学教育领域享有盛誉，吸引了众多优秀学子。
1843年8月，巴斯德成功考入巴黎高等师范学院，攻读化学和物理的教学法。在巴黎高等师范学院，巴斯德表现出色，不仅在课堂上认真学习，还经常在实验室里进行实验，验证课堂上学到的知识。他几乎每天都在实验室度过，因此被同学们戏称为“实验室的蛀虫”。这种勤奋和执着的态度为他日后的科学研究打下了坚实的基础。
1846年，23岁的巴斯德从巴黎高等师范学院毕业，并顺利通过了物理教授资格考试。考官对他的评价极高，认为他是这一届毕业生中唯一具备教育才华的学生。不久后，巴斯德收到了图尔农中学（le lycée de tournon）的物理教师聘书。然而，巴斯德内心深处渴望在巴黎继续从事科学研究，不愿意离开这座充满科学氛围的城市。因此，他决定尽可能拖延赴职时间，希望能够找到在巴黎继续深造的机会。
为了实现这一目标，巴斯德写信给巴黎中央理工学院（l’éle centrale）的创办人之一杜玛（jean-baptiste